GB/T 38477-2020.Determination of gene expression-Western blot.
1范圍
GB/T 38477規(guī)定了用蛋白印跡( Western blot)法測(cè)定基因表達(dá)的方法原理、試劑或材料、儀器設(shè)備、測(cè)定步驟和結(jié)果分析。
GB/T 38477適用于動(dòng)植物組織或體外培養(yǎng)細(xì)胞目的基因表達(dá)測(cè)定。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB/T 6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
3術(shù)語(yǔ)、定義和縮略語(yǔ)
3.1 術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。
3.1.1
基因表達(dá) gene expression
將儲(chǔ)存在DNA分子中的遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯,轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子的過(guò)程。
3.2縮略語(yǔ)
下列縮略語(yǔ)適用于本文件。
BSA:牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin)
ECL:增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光( Enhanced Chemiluminescence)
SDS:十二烷基硫酸鈉( Sodium Dodecyl Sulfate)
SDS-PAGE:十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)
TBS: Tris緩沖鹽溶液( Tris Buffered Saline)
TBST :吐溫-20/ Tris緩沖鹽溶液(Tween-20/ Tris Buffered Saline)
4.原理
SDS-PAGE分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到轉(zhuǎn)印膜上后，先用抗目的蛋白質(zhì)的一抗與轉(zhuǎn)印膜上的蛋白質(zhì)反應(yīng),然后利用帶標(biāo)記的二抗與一抗反應(yīng),最后根據(jù)二抗標(biāo)記物的特性,檢測(cè)微量蛋白質(zhì)。

檢測(cè)流程

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