GB/T 38740-2020.Laboratory animal-Method for examination of simian Marburg virus (MARV).
1范圍
GB/T 38740規(guī)定了猴馬爾堡病毒實時熒光RT-PCR檢測的操作方法。
GB/T 38740適用于猴馬爾堡病毒的檢測。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB/T 6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法
GB/T 18088出入境動物檢疫采樣
GB 19489實驗室生物安 全通用要求
3術(shù)語和定 義
下列術(shù)語和定義適用于本文件。
3.1
馬爾堡病毒 Marburg virus
一種高致病性病毒,屬絲狀病毒科(Filoviridae),單股負鏈RNA病毒,基因組約19.1kb,為已知的最大的負鏈RNA病毒。
3.2
逆轉(zhuǎn)錄實時熒光聚合酶鏈式反應(yīng) real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction; real-time RT-PCR
將mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后再作為模板進行實時熒光PCR擴增。PCR反應(yīng)體系中加入一對引物的同時加入一條特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸片段,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR特異性擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
3.3
噪音 noise
熒光PCR儀在僅僅使用PCR管和水的狀態(tài)下的本底熒光強度。
3.4
Ct值 cycle threshold value
從基線到指數(shù)增長的拐點所對應(yīng)的PCR反應(yīng)循環(huán)次數(shù)。

檢測流程

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